量子点荧光免疫吸附分析（Quantum dot-linked immunosorbent assay，QLISA）原理与酶联免疫吸附分析（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）相似，是指利用抗体与相应抗原的特异性结合反应，对样品进行定性或定量检测的分析方法。不同的是，ELISA使用酶联标记物催化显色底物产生有色产物，利用显色深浅进行定量分析；而QLISA则采用量子点标记物产生荧光信号，指示特定抗原或抗体是否存在，并利用荧光强弱进行定量分析。

ELISA方法灵敏度高，可进行定量检测。但操作繁琐，定量重复性较差，结果易受酶活性及底物稳定性影响。量子点作为新型荧光纳米材料运用于QLISA，具有荧光效率高、稳定性高、Stockes位移较大、发射光谱窄而对称、单一波长多色激发等诸多优秀的荧光特性，可替代ELISA，实现高灵敏多指标同时检测，且无需显色操作、方便快捷、重复性高，同时结果可在较长时间内多次激发观测保持稳定。

与ELISA相似，按照实验方法分类，QLISA主要也可分为夹心法、间接法、以及竞争法。

夹心法

夹心法常用于检测大分子抗原（具有多个不同的抗原表位），一般操作步骤为:

1. 将具有专一性抗体（通常为单克隆抗体）吸附固定于塑料孔板上，完成后洗去多余抗体，加入合适的封闭剂以封闭孔板表面空余位点。

2. 加入待检样本，若含有对应抗原，则其会与塑料孔板上的抗体特异性结合。

3.  洗去多余样品，加入另一种专一性抗体（一抗通常亦为单克隆抗体，与之前的专一性抗体合称配对单抗），与待测抗原进行结合。

4.  洗去多余未结合抗体，加入带有量子点标记二抗（一般为抗抗体），与一抗结合。

5.  洗去多余未结合二抗，按照量子点标记二抗说明书以肉眼或仪器读取荧光结果。

夹心法使用了两种单克隆抗体对抗原不同表位进行识别，因此特异性高，但待测抗原必须是多价抗原，并且有合适的配对单抗，以分别进行夹心，一般不适用于半抗原或小分子抗原。

间接法

间接法常用于检测抗体，一般操作步骤为：

1.  将已知之抗原吸附固定于塑料孔板上，完成后洗去多余抗原，加入合适的封闭剂以封闭孔板表面空余位点。

2.  加入待测样本，样品中若含有对应抗体（一抗），则其会与塑料孔板上的抗原特异性结合。

3.  洗去多余样品，加入带有量子点标记二抗（一般为抗抗体），与一抗结合。

4.  洗去多余未结合二抗，按照量子点标记二抗说明书以肉眼或仪器读取显色结果。

竞争法

竞争法一般用于检测小分子抗原，当需要检测无法获得配对单抗的抗原，或是不易得到足够的纯化抗体时，一般也会考虑使用竞争法。一般操作步骤为：

1.  将具有专一性抗体吸附固定于塑料孔板上，完成后洗去多余抗体，加入合适的封闭剂以封闭孔板表面空余位点。

2.  加入待测样品，样品中的待测抗原与塑料孔板上的抗体特异性结合。

3.  加入带有量子点标记的抗原，与塑料孔板上的未结合抗原的多余抗体进行专一性结合，由于塑料孔板上的抗体数量有限，因此样品中抗原的量越多，则带有量子点标记抗原可结合的剩余抗体就越少，两者相互竞争。

4.  洗去样品与量子点标记抗原，当样品中抗原越多，代表塑料孔板内留下的量子点标记抗原越少，荧光信号越弱。0

QLISA实例：

	图1，QLISA夹心法原理图（Luo, Y. and B. Zhang 2012）
	图2，QLISA与ELISA比浊法比较（Luo, Y. and B. Zhang 2012 ）
	图3，基于量子点的微阵列技术与使用Alexa荧光染料的结果比较（Morales-Narvaez E. and H. Monton 2012）
	图4，基于量子点的微阵列检测病原体（Yang, H. and Q. Guo 2009 ）